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Zymo 質粒中提/大提試劑盒該如何使用?

 更新時間:2022-09-01    點擊量:1942
  Zymo 質粒中提/大提試劑盒采用硅膠模吸附技術,專一地結合質粒DNA。同時采用特殊的溶液P4和過濾器CS1,可有效的出去內毒素、蛋白質雜志;整個提取過程僅需1h,方便快捷。使用本試劑盒提取的質粒DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、連接、轉化和細胞轉染多種細胞等試驗。推薦每次菌液使用量:高拷貝質粒推薦使用量為100ml,得率一般在500-1500ug左右;低拷貝質粒推薦使用量為200ml,得率一般在200-600ug左右。
 
  Zymo 質粒中提/大提試劑盒注意事項:請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
 
  1.溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
 
  2.使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在漂洗液PW中加入無水乙醇。
 
  3.使用前先檢查平衡液BL,溶液P2和P4是否出現(xiàn)結晶或者沉淀,如有結晶或者沉淀現(xiàn)象,可在37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復澄清。
 
  4.注意不要直接接觸溶液P2和P4,使用后應立即蓋緊蓋子。
 
  5.使用過濾器時請將推柄小心緩慢地從過濾管中抽出,避免濾膜因壓力而松動。
 
  6.提取的質粒量與細菌培養(yǎng)濃度,質粒拷貝數(shù)等因素有關。如果所提質粒為低拷貝質?;虼笥?0kb的大質粒,應加大菌體使用量,同時按比例增加P1、P2、P4的用量;洗脫緩沖液推薦在65-70℃水浴中預熱,可以適當延長吸附和洗脫時間,以提高提取效率。
 
  7.實驗前使用平衡液BL處理吸附柱,可以激活硅基質膜,提高得率。
 
  8.用平衡液處理過的柱子建議立即使用,放置時間過長會影響使用效果。
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