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022-66387942一、前言
如圖對(duì)話:
二、測(cè)試原理:
胰蛋白酶活力的測(cè)定,可用苯甲酰-L-精氨酸乙酯(N-α-Benzoyl-L-arginine ethyl ester hydrochloride)簡(jiǎn)稱 BAEE作為底物。在胰蛋白酶的催化下,隨著酯鍵的水解,BAEE逐漸反應(yīng)生成苯甲酰-L-精氨酸(BA)。
即:胰蛋白酶+BAEE→BA
在波長(zhǎng)253nm下BAEE的紫外光吸收遠(yuǎn)遠(yuǎn)弱于BA的紫外光吸收。隨著反應(yīng)進(jìn)行,BA逐漸增多,反應(yīng)體系的紫外吸收亦隨之相應(yīng)增加,以ΔA253 nm計(jì)算胰蛋白酶的活性。
由于血清中含有胰酶抑制成分,所以如果培養(yǎng)基中添加了血清,胰蛋白酶和BAEE的反應(yīng)就會(huì)受阻,吸光度在一定范圍內(nèi)會(huì)減少;
而真正的無(wú)血清培養(yǎng)基中由于不含有胰酶抑制劑成分,所以無(wú)法抑制胰蛋白酶,所測(cè)吸光度應(yīng)和陰性對(duì)照組一致。
三、小編推薦
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