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022-66387942產(chǎn)品名稱:血液/細(xì)胞基因組DNA小量提取試劑盒
產(chǎn)品貨號:TD324-50 (50 次反應(yīng))
TD324-200 (200 次反應(yīng))
產(chǎn)品亮點:
可從全血,有核血,唾液,痰,精子,乳汁,等樣品里提取到高純度的基因組DNA。
獲得的基因組 DNA 產(chǎn)量高、純度好,可以直接用于酶切、PCR、高通量測序等敏感的分子生物學(xué)實驗。
產(chǎn)品特性:
樣品種類: 全血,有核血,唾液,痰,精子,乳汁等樣品,保存在保護(hù)劑里的樣品等。獲得的基因組 DNA 產(chǎn)量高、純度好, 可以直接用 PCR 等各種分子生物學(xué)實驗。不推薦使用此試劑盒提取小 DNA 或者游離 DNA(可使用 TD476 產(chǎn)品) ?
基因組 DNA 大小: 一般可回收到大于 50 kb 的基因組 DNA。如果樣品中存在線粒體DNA,病毒DNA等也會一起提取到。?
DNA 純度: 獲得的基因組 DNA 產(chǎn)量高、純度好, 可以直接用 PCR 等各種分子生物學(xué)實驗。一般情況 Abs260/280 ≥ 1.8 Abs260/230 ≥ 2.0。?
基因組 DNA 產(chǎn)量: 針對哺乳動物一般 100µl 全血中回收到 3µg 以上的基因組DNA。?
需要的儀器設(shè)備: 水浴鍋或者金屬?。?5℃)。微型離心機(jī),渦旋儀。
試劑制備:
在操作之前,需添加1060µl蛋白酶K保存液到每管蛋白酶K(20mg)中。蛋白酶K溶液的濃度為20mg/ml,混勻后,需要放到-20℃長期保存。
提取步驟:
使用基因組DNA洗脫液或其他等滲溶液(如PBS)來重懸培養(yǎng)的細(xì)胞沉淀。( ≤1 x 106 細(xì)胞使用 100 μl 基因組DNA洗脫液 106 -5 x 106 細(xì)胞數(shù)使用200 μl基因組DNA洗脫液)55℃下的蛋白酶K過夜消化不會影響DNA的完整性。
4. 將上清轉(zhuǎn)移至 2L 柱中,2L 柱套在一個收集管里,在≥12,000 x g 離心力下離心1 分鐘。丟棄盛有濾出液的收集管。
5. 將 2L 柱套在一個新的收集管里,添加 400μl 的基因組 DNA 洗滌液 1 到 2L 柱中,在≥12,000 x g離心力下離心1分鐘。倒掉收集管中的廢液。
6. 添加 700μl 的基因組 DNA 洗滌液 2 到 2L 柱中,在≥12,000 x g 離心力下離心1 分鐘。倒掉收集管中的廢液。7. 添加 200μl 的基因組 DNA 洗滌液 2 到 2L 柱中,在≥12,000 x g 離心力下離心1 分鐘。丟棄盛有濾出液的收集管。
8. 將 2L 柱移至干凈的 1.5ml 離心管中直接添加≥ 50μl 的基因組 DNA 洗脫液到柱基質(zhì)上(洗脫液事先在65-70℃水浴中預(yù)熱效果更好,如果是 25mg 的組織可以添加 200μl),室溫下放置 2-5 分鐘,全速離心1分鐘來洗脫基因組 DNA。
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
TD324- 50 | 血液/細(xì)胞基因組DNA小量提取試劑盒 | 50次 |
TD324- 200 | 200次 |
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